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熒光-PCR法相比普通PCR模式的優(yōu)勢(shì)

更新時(shí)間:2023-01-05點(diǎn)擊次數(shù):890
   近年來(lái),熒光-PCR法技術(shù)有了重大改進(jìn)。將傳統(tǒng)PCR檢測(cè)模式中的PCR擴(kuò)增和檢測(cè)相結(jié)合(即在同一個(gè)密閉容器中將PCR擴(kuò)增反應(yīng)與熒光標(biāo)記探針檢測(cè)結(jié)合在一起)檢測(cè)目的核酸的檢驗(yàn)方法紛紛出臺(tái)。這樣的檢測(cè)方法稱為“實(shí)時(shí)”PCR,表示PCR擴(kuò)增產(chǎn)物可被實(shí)時(shí)檢測(cè)。準(zhǔn)確地說(shuō),“實(shí)時(shí)”是指在每一個(gè)PCR循環(huán)后檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物,當(dāng)PCR擴(kuò)增反應(yīng)結(jié)束后,我們可得到每個(gè)樣品的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物變化曲線。通過(guò)分析這些反應(yīng)曲線,不但可得到病原體的定性檢測(cè)結(jié)果,還可對(duì)病原體的數(shù)量進(jìn)行精確定量。
  實(shí)時(shí)熒光-PCR法不僅具有普通PCR的高靈敏性,而且由于應(yīng)用了熒光探針,可通過(guò)光電傳導(dǎo)系統(tǒng)直接探測(cè)PCR擴(kuò)增過(guò)程中熒光信號(hào)的變化以獲得定量結(jié)果,所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高準(zhǔn)確性,克服了常規(guī)PCR的許多缺點(diǎn)。
  熒光-PCR法相比較普通PCR模式的優(yōu)勢(shì):
  1.由于實(shí)時(shí)熒光PCR采用封閉的檢測(cè)模式,因此擴(kuò)增產(chǎn)物導(dǎo)致污染的可能性比普通PCR要小得多。
  2.由于擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)在PCR擴(kuò)增過(guò)程中同時(shí)進(jìn)行,并且數(shù)據(jù)的采集、分析全部由儀器自動(dòng)完成,因此整個(gè)檢測(cè)所需的時(shí)間比普通PCR要節(jié)省許多。
  3.實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)模式功能強(qiáng)大,具備定性、定量、突變、多項(xiàng)目等檢測(cè)功能。而普通PCR要完成上述項(xiàng)目需采用不同的技術(shù)平臺(tái)。
  4.實(shí)時(shí)熒光PCR進(jìn)行定量檢測(cè)時(shí),其定量線性范圍(5-6 logs)比普通PCR(2-3 logs)要寬得多。

TEL:021-61210612

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